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背景:Oculopharyngeal肌肉萎缩症(OPMD)是一种常染色体显性遗传发病后期神经肌肉疾病的特点是近端肌肉无力、上睑下垂、吞咽困难。迄今为止唯一致病突变描述组成的三联体重复扩张两个三胞胎7额外基地外显子1的重复序列polyadenine结合蛋白核1 (PABPN1)基因。这将导致增加长度polyalanine束的PABPN1蛋白质从10到12 - 17残留。
摘要目的:描述另一个突变OPMD。
方法:外显子1的序列分析PABPN1基因进行202病人可能诊断OPMD但消极的三联体重复扩张突变。
结果:典型症状的病例被确定OPMD,负面的错义突变的突变,但重复扩张PABPN1接近正常的3′末端polyalanine密码子重复序列。
结论:单一基丙氨酸密码子的甘氨酸密码子突变变化和结果在连续polyalanine基码的数量的增加。这模仿的效果普遍三合重复扩张突变和代表一个之前从未描述的变异机制。
- OPMD oculopharyngeal肌肉萎缩症
- PABPN1
- oculopharyngeal肌肉萎缩症
- 三联体重复扩张
- polyalanine
来自Altmetric.com的统计
Oculopharyngeal肌肉萎缩症(OPMD)是一个晚期发病居多的遗传条件,通常表现为吞咽困难,上睑下垂,后来可能伴随着进步近端肢体软弱。这种疾病的根本原因是一个扩张的三核苷酸重复序列通常10连续的丙氨酸密码子编码外显子1 polyadenine结合蛋白核基因(PABPN1,也称为PABP2) 14号染色体上的事情。1大多数发表的报告描述了额外三联体作为纯gcg重复;然而,一些研究已经确定了GCA散布在扩大GCG序列。2 -4扩张突变引起的增加PABPN1丙氨酸残基的蛋白质数量和相关的沉积特征核灯丝在骨骼肌纤维夹杂物。brai等1发现扩大等位基因有一个额外的2 - 7主导性继承条件和丙氨酸密码子也描述了一种隐性等位基因组成的一个额外GCG三联体。
我们以前PABPN1基因外显子1的分析描述288年OPMD可能的诊断的病人,其中86有一个扩张突变。2在这里,我们描述一个案件为阴性点突变的扩张突变但接近polyalanine密码子的3′末端重复序列。
方法
主题
病人是一个女性的西北欧洲起源和被称为OPMD遗传分析,享年65岁。上睑下垂发达,享年61岁,其次是吞咽困难。她的眼球运动正常,周围肌肉的正常的力量。肌酸激酶水平正常122 IU / l(正常< 180)。没有可供分析的肌肉组织学活检。她母亲发达下垂,享年70岁之后,严重的吞咽困难需要放置一个经皮胃造口术。她的外祖父和三个母亲兄弟姐妹一半(两个男,一个女)还开发了下垂在晚年(图1)。没有样品可以从渊源者的亲属。
家族的血统。III.1 =渊源者;ii . 2发达ii .轻度上睑下垂70岁患有严重吞咽困难;I.2,按,ii II.4和II.5发达下垂。
样本202病人诊断为疑似OPMD和消极的古典OPMD重复扩张突变也分析,结合80控制样本的西北欧洲血统没有已知OPMD家族史。家族谱系图1所示。
分子分析
样本被称为血EDTA抗凝和DNA提取使用标准程序。5样本分析的存在PABPN1基因外显子1 polyalanine密码子扩张通过聚合酶链反应(PCR)扩增,如前所述。1,2,6DNA序列分析是由外显子1的放大PABPN1基因的PCR卷20μl包含50 ng的基因组DNA和0.5单位Taq(:,“安全”Taq干德雷顿,剑桥郡,英国),使用制造商的建议反应缓冲(缓冲J)。引物序列如下:PABPF(向前),5′公司治理文化AGT GCC 20有条件现金援助TAGA-3′;PABPR(反向),5′aca AGA TGG公司治理文化公司治理文化公司治理文化CCC GGC-3′。
热循环条件94°C 12分钟紧随其后25 94°C的周期为30秒,30秒,62°C和72°C 30秒,最后一步的7分钟72°C。
在正向和反向测序分析方向然后使用ABI 242碱基对进行PCR产品大染料终结者循环测序化学版本1.1 (PE生物系统,诺沃克,康涅狄格,美国),ABI 3100 DNA分析仪。
结果
共202个样本称为PABPN1 OPMD但没有证据的外显子1扩张突变被测序。病人,其中一个是发现的第1外显子点突变PABPN1基因(图2),突变是c。35G→C base change resulting in a glycine to alanine substitution at amino acid position 12 (p.Gly12Ala). [The nomenclature follows the Human Genome Variation Society guidelines, web site ‘http://www.hgvs.org/的加入,利用DNA序列号码ENSE00001099642]。
编码序列的第一个25的密码子PABPN1基因表明c。35G→C base change and the predicted Gly12Ala amino acid change identified in patient A
没有证据表明这种突变被发现在367年其他情况下包括剩余的201三联体重复扩张- OPMD推荐,80控制样品和86三联体重复扩张积极OPMD之前完成样品。2
前25码的编码序列图2所示。
讨论
直到现在外显子1中的三联体重复扩张是唯一已知的PABPN1突变OPMD的温床。然而,这里描述的点突变的表型影响与普通OPMD重复扩张突变。
病人已经出现吞咽困难和上睑下垂症状典型的OPMD后期,和家族病史是常染色体显性遗传的强烈提示(图1)。她是杂合的基础的变化PABPN1基因改变甘氨酸残基在牛是守恒的,老鼠,和人类的同系物。这可能是一个中立的多态性,因为它没有在普通人群中,事实上,其他物种的网站是守恒的,和基地的性质变化。G→C替换更改一个甘氨酸GGG密码子,位于立即3′的正常10丙氨酸密码子重复序列,一个丙氨酸GCG密码子(图2),立即3′进一步两个丙氨酸密码子。这个基本没有基因替换扩张因此生成一个连续的序列13丙氨酸密码子,这是诱发疾病的常见的三联体重复扩张突变。而OPMD患者13丙氨酸残基突变扩张,病人没有氨基酸序列Gly-Ala-Ala立即3′的重复序列;然而,这似乎没有任何影响的疾病,和她的临床症状符合OPMD但有些温和,与后来出现的(GCN)13扩张突变。上下文中的临床诊断OPMD和点突变的存在PABPN1、肌肉活检被认为是临床不合理,没有完成。
总之我们已经识别出的点突变PABPN1基因与OPMD病人和插图小说突变机制未记录。然而,这可能是唯一的OPMD因为体积小的PABPN1基因polyalanine束,周围的序列的性质,和小尺寸需要增加引起疾病。
确认
我们感谢所有患者和临床医生发送样品进行分析和大卫班扬博士建议。
脚注
利益冲突:没有宣布