文摘
客观的描述表型、治疗反应和自身免疫的结果针对突触囊泡膜蛋白、神经元(B2)的适配器蛋白质3 (AP3)。
方法存档血清和脑脊液标本(616025年上映)窝藏非保密突触模仿amphiphysin-immunoglobulin G抗体(免疫球蛋白)组织的间接免疫荧光试验(IFA)重新评估了新颖的免疫球蛋白G染色模式。自身抗原被确定通过免疫印迹和质谱分析。重组免疫印迹和cell-binding化验(CBA)被用来证实抗原特异性。临床资料回顾性获得。
结果血清(10)和CSF(6)标本10位病人产生相同的IFA染色模式在老鼠神经系统组织,特别是在小脑(浦肯野神经元perikarya、颗粒层突触和齿状区域),脊髓灰质背根神经节和交感神经节。抗原显示通过质谱分析和证实了重组化验(免疫印迹和CBA) AP3B2。10个血清反应阳性的患者,6是女性;出现症状平均年龄为42年(范围24-58)。临床信息可供9例,亚急性发作和快速进步的步态共济失调。神经系统表现是myeloneuropathy(3),周边感觉神经病变(2),小脑性共济失调(2),和脊髓小脑的共济失调(2)五个病人接受免疫治疗;没有改善,但是他们并没有恶化在随访期内(中位数36个月;范围3 - 94)。两个病人(包括癌症)死亡。50控制血清之一是积极通过免疫印迹(但不是IFA或者CBA)。
结论AP3B2(以前叫β-neuronal adaptin-like蛋白质)自身免疫出现罕见,伴随着共济失调(感官或小脑),和可能是可以治愈的。
术语表
- ANNA-1=
- 自身免疫和antineuronal核抗体1型;
- AP3B2=
- 适配器蛋白质亚基B2;
- CBA=
- cell-binding化验;
- FITC=
- 异硫氰酸荧光素;
- 哈佛商学院=
- 汉克斯平衡盐溶液;
- IFA=
- 免疫荧光分析;
- 免疫球蛋白=
- 免疫球蛋白G;
- 总会在=
- 正常山羊血清;
- 美国公共电视台=
- 磷酸盐;
- TRITC=
- tetramethylrhodamine异硫氰酸酯;
- ZnT3=
- 锌转运体3
一些良好的自身免疫性神经疾病有不同的表现,符合多病灶的神经自身抗原的表达在中央,外围,自主神经系统。1例如,多种神经患者自身免疫和antineuronal核抗体1型(也称为anti-Hu ANNA-1)可能表现为周围神经病变(经典,但不仅限于,感官neuronopathy),共济失调,脊髓病,神经异常、脑病、或混合表现。2,3我们描述一个由步态instability-predominant神经系统自身免疫性疾病统一展示。所有患者有共济失调(一个或其他的小脑,脊柱,或感觉神经功能障碍)和适配器蛋白质3单元B2 (AP3B2)免疫球蛋白G(免疫球蛋白)检测血清和CSF。27年前,这种自体抗体是描述在一个病人自身免疫性小脑性共济失调和被任命为anti-Nb免疫球蛋白。4
方法
标准协议的审批、登记和病人同意
梅奥诊所的机构审查委员会批准人类标本采集和回顾性研究病人的历史(IRB # 16 - 009814)。
研究人群
在1993年1月1日,4月30日,2017年,梅奥诊所的神经免疫学实验室测试组织的间接免疫荧光试验(IFA),在服务的基础上,616025年对患者血清和脑脊液标本提交接受检查可疑的多种神经或自身免疫性脑炎的疾病。这些标本,367(血清,334;CSF, 34)显示模式扩散神经突触(神经纤维网)染色类似(但不是会议标准)amphiphysin免疫球蛋白,并被记录在我们的档案记录。所有367个标本被IFA测试,详细分类根据各自的免疫球蛋白g染色模式。5其中10例相同的染色模式,这是本报告的主题。临床资料(9例)是通过对梅奥诊所记录(4)和来自外部的医生通过电话面试过程中与我们实验室(5)临床咨询。5,额外的信息是在研究过程中获得的3。
通过共焦显微镜间接IFA和双染色
病人血清(1:240)和CSF(1:2)测试cryosections复合成年小鼠组织:小脑,中脑,大脑皮层、海马、肾、肠道,如前所述。6鼠标的双重染色组织,AP3B2兔多克隆免疫球蛋白(Proteintech 1:50-1:100活性多肽与650 - 1082年,Rosemont, IL)使用。二次抗体是异硫氰酸荧光素(FITC)共轭反(1:200)和tetramethylrhodamine异硫氰酸酯(TRITC)共轭anti-rabbit免疫球蛋白g (1∶SouthernBiotech、伯明翰、AL)。共焦图像捕获使用显微镜(×20×40水浸没透镜,LSM780;德国卡尔蔡司AG)从)。
海马神经元的准备
大鼠海马从E18-20解剖动物和脑膜被移除。组织被切碎的汉克斯平衡盐溶液(哈佛商学院)。剁碎组织孵化在4.5毫升哈佛商学院与0.5毫升0.25%胰蛋白酶37°C水浴和温柔的反演每5分钟15分钟。组织被哈佛商学院+ 10%胎牛血清在37°C DNAse 5分钟。洗后2次在哈佛商学院37°C,组织在哈佛商学院被磨碎。较大的组织块被允许定居和上层清液被转移到新管。粉状是重复和上层的总和。细胞计数和镀5×104在神经基底+媒体B27补充(Gibco,马里兰州)和37°C在湿润的气氛中举行9%的空气/ %股份有限公司2。新鲜的培养基是交换介质体积每4天的一半。
住海马神经元免疫荧光
六到十天在试验之前,神经元在层粘连蛋白/聚-亚文化l-lysine-coated玻璃盖玻片(MatTek,亚什兰,MA)×104。在4°C步骤之后进行。与磷酸盐(PBS)清洗后,神经元受到30分钟患者样本(所有可用10血清或4模型)稀释10%正常山羊血清(上天)1:5或稀释,分别。控制从NMDAR脑炎患者脑脊液标本,7从健康的参与者,血清和脑脊液正常压力脑积水患者。细胞被洗PBS和暴露30分钟FITC-conjugated山羊反人类免疫球蛋白二次抗体(SouthernBiotech)稀释10%的门店。细胞被洗在PBS和暴露于4%多聚甲醛在室温下,15分钟。标记轴突,细胞permeabilized 0.2% Triton x - 100 10分钟,洗在PBS,然后按顺序暴露10%门店30分钟,和鼠标anti-acetylated微管蛋白免疫球蛋白(Sigma-Aldrich[圣。路易斯,密苏里州),稀释1:50 0 10%门店16小时在4°C)。细胞被洗,探索TRITC-conjugated山羊anti-mouse免疫球蛋白,在PBS清洗,安装在延长黄金与DAPI(表达载体,卡尔斯巴德,CA)。共焦图像捕获使用蔡司LSM710共焦显微镜×40水油浸物镜。
免疫印迹
对西方的屁股,一只老鼠胞质小脑提取4% - -15%聚丙烯酰胺凝胶上分离,transblotted硝化纤维膜,并对患者与健康对照组或免疫球蛋白(1:400稀释),或商业AP3B2-specific免疫球蛋白(1:5,000)。重组AP3B2多肽(人类蛋白质残基650 - 1082;∼73 kDa)用来证实抗原特异性(Proteintech)包括AP3B2 c端区域,最初证明包括相关的自身抗原。8我们评估所有患者的血清和10个健康对照。
蛋白质纯化,并通过质谱测序
血清免疫球蛋白G的3例(2、4、8)和1健康控制蛋白质复合体G磁珠(Dynabeads;表达载体,热费希尔科学(沃尔瑟姆,MA))和暴露在老鼠大脑和小脑蛋白质提取(20分钟,在室温下)。洗后,珠被煮5分钟2×Laemmli样本缓冲区。筛选了蛋白质在5%聚丙烯酰胺凝胶电泳,和位于Coomassie g - 250染色法(Bio-Rad大力神,CA)和免疫印迹。带对应于免疫反应性切除和分析了高压液相色谱电喷雾串联质谱(梅奥诊所的医学基因组Facility-Proteomics核心)。
Cell-binding化验(CBA)
AP3B2特异性经间接免疫荧光法在HEK293细胞转染长篇AP3B2同种型1互补DNA (SWISSPROT # Q13367)。控制细胞转染空载体。细胞生长在玻璃盖玻片,用冰冷的丙酮固定,准备作为效果生物芯片碎片在显微镜载玻片的马赛克AP3B2-expressing和控制细胞(Euroimmun AG,吕贝克,德国)。
控制测试
血清控制测试间接IFA(564)从317年健康对照组,94年梅奥诊所疑似患者多种疾病和n型钙通道抗体积极性(2011 - 2013),963癌症患者没有神经系统的疾病,和90年其他神经疾病患者(克雅二氏症[30],中枢神经系统性红斑狼疮红斑的[10],多发性硬化[20],和肌萎缩性脊髓侧索硬化症[30])。血清检测AP3B2-IgG健康免疫印迹30和20≥1其他多种抗体(浦肯野细胞胞质抗体1型(PCA高1反必经哟),10;安娜高1 10)。标本测试AP3B2-IgG CBA与≥20名健康和13 1其他多种抗体(PCA高1 7;安娜高1 6)。
数据可用性
本文相关的所有数据都包含在或出版在线补充。
结果
自身抗原的特性
免疫组织化学神经抗原的分布
间接IFA 10个病人的血清(10)和(6)脑脊液标本,使用cryosections小鼠大脑和内脏组织,演示了一个相同的染色模式在每个(图1中,模拟)。患者免疫球蛋白反应与perikarya分散的浦肯野神经元和肌间神经丛,小脑颗粒层突触,齿状的区域,可以区别于其他突触神经免疫球蛋白表)。没有染色检测肾实质的或肠道(没有显示)。
(g)病人血清免疫球蛋白收益率突触模式(A)免疫荧光的小脑颗粒层(GL)多分子层(ML),加上perikarya浦肯野细胞(PC);(B)小脑齿状核(DN);(C)海马(Hi)、丘脑(Th);(D)大脑皮层(Cx)和神经节神经元perikarya并列胃平滑肌(箭头);和(E)脊髓灰质(尤其是背地区(箭头))。(F, G)免疫反应性是最突出的perikarya背根(F,扩大在G)和交感神经节的神经元和背根神经纤维(G)。在免疫印迹(H),胞质溶解产物小鼠小脑包含一个杰出的抗原蛋白大约150 kDa,与病人血清中免疫球蛋白1 - 9活性,但不与健康对照血清免疫球蛋白。比例尺:A、B、D 50μm;C, eg: 100μm。
突出的反应也观察到在脊髓(特别是在背角;图1 e),最引人注目的是,在paraspinal神经节(背根和同情)和一定程度上在背根(图1中,F和G)。
识别和确认AP3B2抗原
免疫印迹的小鼠小脑溶解产物与病人的血清,但是不健康控制血清,发现一个共同的免疫反应性的乐队感兴趣的与近似分子量150 kDa (图1 h)。识别目标抗原,免疫沉淀反应的小鼠小脑提取进行了利用患者的血清2,4,8。electrophoretically分离蛋白质的质谱分析鉴定AP3B2 150 kDa蛋白质。AP3B2(以前称为β-neuronal adaptin-like蛋白质)是在1991年报道的目标抗原的单例自身免疫性小脑性共济失调。4
没有病人血清1或4可用CSF,证明免疫球蛋白绑定住海马体神经元(图2)。相比之下,从NMDAR-positive病人CSF强烈束缚住神经元。患者的血清1 - 10展示了强烈的免疫反应性与73 kDa AP3B2重组多肽片段(残留650 - 1082)和AP3B2 CBA(与AP3B2-transfected细胞活性,但不是mock-transfected细胞)(图3中,A和B)。可以从患者脑脊液标本1、5、7也CBA和测试是积极的。所有470控制测试IFA是负的。一个50控制血清(从健康的参与者)测试通过重组AP3B2免疫印迹是积极的,但后来证明- IFA和CBA。IFA证明colocalization商业AP3B2小鼠脑组织和患者免疫球蛋白(免疫球蛋白图3 c)。
(A)控制脑脊液正常压力脑积水患者和(B)健康控制血清不绑定到生活表面的海马神经元。CSF (D)和患者的血清(E) - 10(从病人代表图片5)绑定到神经元的文化。相比之下,NMDAR-IgG-positive病人CSF绑定在一个点状的模式海马神经元的细胞外表面(C、绿色)。细胞被poststained乙酰化微管蛋白识别轴突(F,红色)。核与DAPI染色板(白色)。规模的酒吧,20μm。
通过免疫印迹(A),从9个病人血清免疫球蛋白G(免疫球蛋白),但没有一个6健康控制血清,绑定到一个重组AP3B2 c端多肽片段。(B)积极性AP3B2-specific cell-binding测定血清中病人7。(C)商业colocalizes AP3B2抗体与免疫反应性生产鼠标由病人小脑AB3B2-IgG(上),而不是与amphiphysin-IgG-positive病人(中)或健康控制(底部)。左栏,病人免疫球蛋白;中间列,兔抗AP3B2应承担的免疫球蛋白;右列,合并后的图像。酒吧、规模50μm。
血清学的结果
10个病人,9是回顾性地从梅奥诊所的神经免疫学实验室档案(从1997年到2015年)和1例被确认后的前瞻性研究。IFA端点稀释1:30,720在血清(范围3840 - 61440)和1:64 CSF(范围32 - 256)。n型电压门控钙通道抗体共存于8 10患者的血清中值为0.07 (0.04 - -0.15;正常的≤0.03 nmol / L), 2例效价较低GAD65抗体检测(0.17、0.03 nmol / L;正常≤0.02 nmol / L,表)。
摘要人口和临床结果
六个十患者是女性。症状出现时的平均年龄是42年(范围24-58)。
神经系统表现
10个病人临床信息可在9(除了病人2)。平均随访期为36个月(范围3 - 94)。出现症状是亚急性和快速进步在所有9周的病人。myeloneuropathy AP3B2自身免疫综合征的表现,3;周边感觉neuronopathy, 2;小脑性共济失调,2;和脊髓小脑的共济失调,2 (表)。
所有9患者步态障碍,陪同感觉性共济失调在4 5和小脑性共济失调。患者小脑疾病,其他表现症状包括构音障碍、4;眩晕,4;头晕、2和震颤,1。患者的神经病变或myeloneuropathy,其他表现症状包括感觉异常、弱点,或麻木(2)。两个患者自主神经功能失调影响胃肠蠕动,2,或膀胱,1。
小脑体征包括共济失调步态,4;眼球震颤,4;测距不准、4和dysdiadochokinesia 3。神经病变患者中,感觉有共济失调步态3、弛缓性截瘫1、反射消失或反射减退3,和远端分布针刺,振动,温度在5。两个小脑性共济失调患者的下肢无反射和双边巴宾斯基的迹象。myeloneuropathy有反射亢进患者的下肢和单边巴宾斯基的迹象。
肿瘤和自身免疫性的选择
9的一个病人肾细胞癌发现前瞻性。AP3B2免疫反应性不是肿瘤检测的部分。一个额外的患者b细胞淋巴瘤的历史。两个病人死亡。共存的自身免疫性疾病包括干燥综合征,1;系统性硬化症,1;和甲状腺功能减退,1。
CSF研究
CSF分析数据可供6 9例;都是不正常的。四个白细胞计数升高(中值7 /μL;正常范围6 - 8(≤5]),3蛋白升高(中值46 mg / dL;正常范围39 - 87 mg / dL (≤35 mg / dL)), 1有一个免疫球蛋白g指数和合成率增加,和2升高CSF-exclusive寡克隆带数字(表)。
成像和电生理学
大脑MRI显示小脑萎缩在所有4小脑性共济失调患者(图4中,A。一个和A.b)。两国T2 hyperintensities皮层下和室周的白质也出现在其中一个病人(没有显示)。脊髓MRI图像异常3 6例评估(3 myeloneuropathy):脊髓萎缩和双边T2 hyperintensities T10中央灰质内病人(病人3;图4中,B。和反方向),纵向广泛T2信号异常后列(病人5,图4中,C。一个和C.b),著名的萎缩(病人7,图中未显示)。4例患者出现肌电图显示异常的发现:弥漫性大纤维感觉神经病变2,感觉neuronopathy 1,严重的胸和腰骶段polyradiculopathy单独myeloneuropathy患者。
神经病理学
腓肠神经活检组织得到病人5 (myeloneuropathy), 2年之后出现症状。嘲笑周围神经纤维制备了增加空神经链和轴突退化(图5一个)。免疫组织化学显示CD68 +神经内膜巨噬细胞浸润(图5 b)。多病灶的大小有髓纤维损失符合neuron-directed细胞毒性(图5中,C和D)。
治疗和结果
五个九患者接受一个或多个免疫疗法;没有一个改善。三个没有恶化和两个进步尽管治疗多种免疫疗法。两个癌症患者死亡。最后随访,2例患者能够独立走动,3是用甘蔗或沃克和1是坐在轮椅上。改良Rankin量表得分最后随访中值为4(范围2 - 6)。平均持续时间从开始到最后的随访是36个月(范围3 - 84)。
讨论
所有9患者临床信息我们确认AP3B2-reactive免疫球蛋白有神经表型共济失调步态障碍次要,小脑或感觉,或者两者的混合。此外,胃肠神经异常2例。临床发现的多病灶的分布与病人的血清免疫球蛋白对小鼠免疫反应性神经组织,在小脑浦肯野神经元,最突出的背侧脊髓背根神经节,和自主神经节。8这个独特的免疫球蛋白g染色的特异性神经元模式统一的病人血清。免疫球蛋白在所有病人标本绑定到c端多肽片段的vesicle-coat protein-sorting适配器蛋白质复杂,AP3B2,早些时候确认为一个自身抗原活性与血清中免疫球蛋白的病人呈现pancerebellar共济失调与扩散反射亢进和双边足底伸肌反应。4,8
2我们的血清反应阳性的患者的脊髓MRI显示纵向广泛,对称,tract-restricted, T2-signal异常的放射的标志tractopathies与某些自身免疫性脊髓炎,特别是多种实体。10亚急性小脑综合症报道在原始AP3B2自身免疫迅速发展的情况下,将病人床上2个月内。4我们的一些患者相似的症状,发病和进展和显著的残余神经障碍。然而,3的5不加重治疗后(可能是由于治疗或自然历史),和一些相对较长的生存。
索引病人缺乏检测癌症,但多种原因被怀疑寻找AP3B2免疫反应性在neuroectodermal肿瘤细胞系(黑色素瘤,小细胞肺癌和神经母细胞瘤)。4两个病人过去或同生癌症的证据(分别为淋巴瘤和肾细胞癌),但多种病因是不确定的。肾细胞癌缺乏检测AP3B2免疫反应性,肿瘤切除术后病人没有改善和广泛的免疫疗法。她死后,半身不遂,7年后出现神经症状。患者的年龄(平均42年)和病人之前报道(35年)明显小于通常报道什么多种神经系统疾病(60 - 65年)。3,11,12
的组成和针对突触囊泡是由胞质涂层成分。的clathrin-independent heterotetrameric AP3蛋白是由β,δ,μ、σ亚基。13AP3A无处不在(表达神经细胞体)和指导蛋白质核内体和溶酶体。14的neuron-restricted AP3B2同种型驻留在树突和轴突,和指导蛋白质核内体突触囊泡。8作为生物标志物,AP3B2免疫球蛋白艾滋病离散神经综合征的诊断,但其抗原的胞质位置预测,这种自体抗体不是neuropathogenic本身,而是一个代孕CD8 +细胞毒性T细胞靶向多肽的标志来自AP3B2。
血清的AP3B2-IgG-positive患者除1免疫沉淀反应n型(Cav2.2)电压门控钙通道包裹着radioiodinated omega-conotoxin GVIA。15明显共存2离散神经自身抗体表明Cav2.2和AP3B2可以作为co-immunogens。或者,地形本地化的Cav2.2通道和神经终端AP3B2表明co-immunoprecipitated Cav2.2可能代表这些分子之间的生理突触前复杂。可以类比的co-immunoprecipitation detergent-solubilized Kv1钾离子通道和Lgi1 CASPR2。16,17两个病人积极GAD65抗体值较低,在一般人群中,常见的和没有神经系统的意义。
AP3-sorted蛋白质,如锌转运蛋白3 (ZnT3),都被AP3A和B2亚型,在同一核内体,并路由到突触水泡或溶酶体途径,分别。18,19在老鼠身上的纯合缺失AP3B2突触囊泡膜蛋白基因,ZnT3和其他直接专门为降解溶酶体。电生理,这些老鼠表现出衰减的动作电位的异步释放神经递质,确保精度射击。20.七个人与癫痫发作性脑病和视神经萎缩之前1年的年龄和5与张力减退和受损的运动发展据报道在AP3B2常染色体隐性突变。21与巨结肠疾病,其他孩子的自主神经病变结肠、AP3B2突变也被报道。22我们的病人的胃肠蠕动障碍在2似乎可能归因于AP3B2自身免疫。
符合一个专门胞质定位在突触,没有我们的病人的免疫球蛋白反应性与细胞外域的跨膜蛋白。然而,AP3B2免疫球蛋白检测使用固定和permeabilized AP3B2-specific细胞系。细胞毒性T淋巴细胞和抗体,公认的效应器致病性自身免疫性神经障碍定义为细胞内免疫球蛋白特定神经抗原(如CDR2或住房和城市发展部PCA-1抗原和ANNA-1自身抗体)。相反,CD8 + t细胞浸润是neuropathologic标志的障碍,例如,病人的小脑共济失调与PCA-1免疫球蛋白和背根神经节与ANNA-1相关的多种感官neuronopathy患者免疫球蛋白。12,23,- - - - - -,25背根神经节组织并不是可以从AP3B2-IgG-positive患者我们报告感觉性共济失调。然而,活检,从一个病人证明腓肠神经退行性变化与焦轴突纤维损失,而不是炎症。,这是合理的退行性变化发生在远端感觉神经次要对背根神经节细胞毒性t细胞攻击。
理想情况下,测试AP3B2免疫球蛋白g将纳入诊断实验室算法评估疑似自身免疫性共济失调患者。质量保证,2步骤所需的积极性。首先,一个组织的免疫组织化学检测分析允许同时评价多个ataxia-pertinent自身抗体(例如,metabotropic谷氨酸receptor-1免疫球蛋白g,以及AP3B2免疫球蛋白)。其次,分子反射确认步骤允许确认IFA发现。50控件显示通过免疫印迹反应性,但随后的调查显示- IFA和CBA。因此,利用一个AP3B2-IgG-specific免疫印迹在隔离可能导致假阳性。
自身免疫针对神经元AP3B2是另一个考虑的鉴别诊断患者呈现混合小脑和感觉性共济失调和myeloneuropathy。其他潜在治疗实体必须排除在外,如ANNA-1自身免疫、干燥综合症,2,26维生素B12缺乏(恶性贫血)或其他缺陷的铜、锌、叶酸,或者由于膳食维生素E缺乏症,malabsorptive肠病。27
研究资金
这项研究是由个性化医学中心,梅奥诊所,Euroimmun。
信息披露
j . Honorat有专利申请等待Septin-5-IgG作为自身免疫性神经疾病的生物标志物。a . Lopez-Chiraboga报告没有披露相关的手稿。T.J. Kryzer金融利益以下知识产权:“视Neuromyelitis标记。”这种技术专利已发布,已授权给商业实体。T.J. Kryzer已收到累积版税的联邦阈值显著大于经济利益从这些技术的许可,但没有收到版税出售这些测试的梅奥医学实验室。l·科莫罗夫斯基和m . Scharf受雇于Euroimmun AG)。美国Hinson报告没有披露相关的手稿。诉列侬拥有专利申请等待Septin-5-IgG作为自身免疫性神经疾病的生物标志物。她有一个金融感兴趣以下知识产权:“视Neuromyelitis标记。”这种技术专利已发布,已授权给商业实体。诉列侬已经收到了累积版税的联邦阈值显著大于经济利益从这些技术的许可,但没有收到版税出售这些测试的梅奥医学实验室。美国Pittock有专利申请等待Septin-5-IgG作为自身免疫性神经疾病的生物标志物,并持有相关的专利功能AQP4 / NMO-IgG化验和NMO-IgG作为癌症标记; consulted for Alexion and Medimmune; and received research support from Grifols, Medimmune, and Alexion. All compensation for consulting activities is paid directly to Mayo Clinic. C. Klein reports no disclosures relevant to the manuscript. A. McKeon has a patent application pending for Septin-5-IgG as biomarker of autoimmune neurologic disease; has consulted for Grifols, Medimmune, and Euroimmun; and received research support from Grifols, Medimmune, Alexion, and Euroimmun but has not received personal compensation. Go to首页Neurology.org/N为充分披露。
承认
作者感谢杰奎琳·时援助与活细胞分析发展;勇郭博士和克劳迪娅Lucchinetti,医学博士,与肿瘤染色寻求帮助;和神经免疫学实验室工作人员的后勤和技术援助。
附录的作者
脚注
去首页Neurology.org/N为充分披露。资金信息和披露认为作者相关的,如果有的话,年底提供这篇文章。
这篇文章加工费是由梅奥诊所。
- 收到了2018年10月31日。
- 接受的最终形式2019年4月8日。
- 版权©2019年作者(年代)。发表的Wolters Kluwer健康,公司代表美国神经病学学会。首页
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